Amidasa (AMD)
Enzims:Són catalitzadors biològics macromoleculars, la majoria dels enzims són proteïnes
Amidasa:Catalitzar la hidròlisi de diverses amides alifàtiques i aromàtiques endògenes i estranyes transferint un grup acil a l'aigua amb la producció d'àcids lliures i amoníac. Els àcids hidroxàmics i altres àcids orgànics s'utilitzen àmpliament com a fàrmacs perquè són constituents de factors de creixement, antibiòtics i inhibidors tumorals. Les amidases es poden dividir en acilases de tipus R i de tipus S segons l'estereoselectivitat del catalitzador.
A més de catalitzar la hidròlisi d'amides, l'amidasa també pot catalitzar reaccions de transferència d'acil en presència de cosubstrats com la hidroxilamina.
Les amidases amb diferents fonts tenen una especificitat de substrat diferent, algunes només poden hidrolitzar amides aromàtiques, algunes només poden hidrolitzar amides alifàtiques i algunes hidrolitzar amides α- o ω-amino. La majoria de les amines només tenen una bona activitat catalítica per a amides aromàtiques acícliques o simples, però per a aromàtics complexos, les amides heterocícliques, especialment les amides amb substituents orto, generalment tenen baixa activitat (només uns quants enzims presenten millors efectes catalítics).
Mecanisme catalític:
| enzims | Codi de producte | Codi de producte |
| Enzim en pols | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | un conjunt de 19 amidases, 50 mg cadascuna 19 articles * 50 mg / article, o una altra quantitat |
| Kit de cribratge (SynKit) | ES-AMD-1900 | un conjunt de 19 amidases, 1 mg cadascuna 19 articles * 1 mg / article |
★ Alta especificitat del substrat.
★ Forta selectivitat quiral.
★ Alta eficiència de conversió.
★ Menys subproductes.
★ Condicions de reacció suaus.
★ Respectuós amb el medi ambient.
➢ El cribratge enzimàtic s'ha de dur a terme per a substrats específics a causa de l'especificitat del substrat, i obtenir un enzim que catalitzi el substrat objectiu amb el millor efecte catalític.
➢ No contacteu mai amb condicions extremes com ara: alta temperatura, pH alt/baix i dissolvents orgànics amb alta concentració.
➢ Normalment, el sistema de reacció hauria d'incloure un substrat i una solució tampó (el pH òptim de reacció de l'enzim). Els cosubstrats com la hidroxilamina haurien d'estar presents en el sistema de reacció de transferència d'acils.
➢ L'AMD s'ha d'afegir per última vegada al sistema de reacció amb el pH i la temperatura de reacció òptims.
➢ Tots els tipus d'AMD tenen diverses condicions de reacció òptimes, per la qual cosa cadascun d'ells s'hauria d'estudiar més a fons individualment.
Exemple 1(1):
Activitat d'hidròlisi a diferents substrats d'amida
| Substrat | Activitat específica μmol min-1mg-1 | Substrat | Activitat específica μmol min-1mg-1 |
| Acetamida | 3.8 | ο-OH benzamida | 1.4 |
| propionamida | 3.9 | p-OH benzamida | 1.2 |
| Lactamida | 12.8 | ο-NH2benzamida | 1.0 |
| Butiramida | 11.9 | p-NH2benzamida | 0,8 |
| Isobutiramida | 26.2 | ο-Toluamida | 0,3 |
| Pentanamida | 22.0 | p-Toluamida | 8.1 |
| Hexanamida | 6.4 | Nicotinamida | 1.7 |
| Ciclohexanamida | 19,5 | Isonicotinamida | 1.8 |
| Acrilamida | 10.2 | Picolinamida | 2.1 |
| Metacrilamida | 3.5 | 3-fenilpropionamida | 7.6 |
| Prolinamida | 3.4 | Indol-3-acetamida | 1.9 |
| Benzamida | 6.8 |
La reacció es va dur a terme en una solució tampó de fosfat de sodi 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
| Amides | Hidroxilamina | Hidrazina |
| Acetamida | 8.4 | 1.4 |
| propionamida | 18.4 | 3.0 |
| Isobutiramida | 25.0 | 22,7 |
| Benzamida | 9.2 | 6.1 |
La reacció es va dur a terme en una solució tampó de fosfat de sodi 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
Concentració de reactiu relacionada: amides, 100 mM (benzamida, 10 mM); hidroxilamina i hidrazina, 400 mM; enzim 0,9 μM.
Exemple 2(2):
Exemple 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremòfils, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al. Bioquímica de processos, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al. Química bioorgànica, 2017, disponible en línia 7.
