Amidasa (AMD)
Enzims:Són catalitzadors biològics macromoleculars, la majoria dels enzims són proteïnes
Amidasa:Catalitzar la hidròlisi de diverses amides alifàtiques i aromàtiques endògenes i estranyes transferint un grup acil a l'aigua amb la producció d'àcids lliures i amoníac.Els àcids hidroxàmics i altres àcids orgànics s'utilitzen àmpliament com a fàrmacs perquè són components de factors de creixement, antibiòtics i inhibidors de tumors.Les amidases es poden dividir en acilases tipus R i tipus S segons l'estereoselectivitat del catalitzador.
A més de catalitzar la hidròlisi d'amides, l'amidasa també pot catalitzar reaccions de transferència d'acils en presència de cosubstrats com la hidroxilamina.
L'amidasa amb diferents fonts té una especificitat de substrat diferent, algunes d'elles només poden hidrolitzar amides aromàtiques, algunes d'elles només poden hidrolitzar amides alifàtiques i algunes hidrolitzar les amides α-o ω-amino.La majoria de les amines tenen una bona activitat catalítica només per a amides acícliques o aromàtiques simples, però per als aromàtics complexos, les amides heterocícliques, especialment les amides amb substituents orto, són generalment de baixa activitat (només alguns enzims presenten millors efectes catalítics).
Mecanisme catalític:
| Enzims | Codi de producte | Codi de producte |
| Pols d'enzims | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | un conjunt de 19 amidases, 50 mg cadascuna 19 articles * 50 mg / article, o una altra quantitat |
| Kit de cribratge (SynKit) | ES-AMD-1900 | un conjunt de 19 amidases, 1 mg cada 19 articles * 1 mg / article |
★ Alta especificitat de substrat.
★ Forta selectivitat quiral.
★ Alta eficiència de conversió.
★ Menys subproductes.
★ Condicions de reacció suaus.
★ respectuós amb el medi ambient.
➢ El cribratge enzimàtic s'ha de dur a terme per a substrats específics a causa de l'especificitat del substrat, i obtenir un enzim que catalitzi el substrat objectiu amb el millor efecte catalític.
➢ No contactar mai amb condicions extremes com ara: alta temperatura, pH alt/baix i dissolvent orgànic amb alta concentració.
➢ Normalment, el sistema de reacció hauria d'incloure substrat, solució tampó (el pH de reacció òptim de l'enzim).Els cosubstrats com la hidroxilamina haurien d'estar presents en el sistema de reacció de transferència d'acils.
➢ L'AMD s'ha d'afegir l'últim al sistema de reacció amb un pH i una temperatura de reacció òptims.
➢ Tots els tipus d'AMD tenen diverses condicions de reacció òptimes, per la qual cosa s'ha d'estudiar individualment cadascun d'ells.
Exemple 1(1):
Activitat d'hidròlisi a diferents substrats d'amida
| Substrat | Activitat específica μmols min-1mg-1 | Substrat | Activitat específica μmols min-1mg-1 |
| Acetamida | 3.8 | ο-OH benzamida | 1.4 |
| Propionamida | 3.9 | p-OH benzamida | 1.2 |
| Lactamida | 12.8 | ο-NH2benzamida | 1.0 |
| Butiramida | 11.9 | p-NH2benzamida | 0,8 |
| Isobutiramida | 26.2 | ο- Toluamida | 0,3 |
| Pentanamida | 22.0 | p- Toluamida | 8.1 |
| Hexanamida | 6.4 | Nicotinamida | 1.7 |
| Ciclohexanamida | 19.5 | Isonicotinamida | 1.8 |
| Acrilamida | 10.2 | Picolinamida | 2.1 |
| Metacrilamida | 3.5 | 3-Fenilpropionamida | 7.6 |
| Prolinamida | 3.4 | Indol-3-acetamida | 1.9 |
| Benzamida | 6.8 |
La reacció es va dur a terme en una solució tampó de fosfat de sodi 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
| Amides | Hidroxilamina | Hidracina |
| Acetamida | 8.4 | 1.4 |
| Propionamida | 18.4 | 3.0 |
| Isobutiramida | 25.0 | 22.7 |
| Benzamida | 9.2 | 6.1 |
La reacció es va dur a terme en una solució tampó de fosfat de sodi 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
Concentració de reactiu relacionada: amides, 100 mM (benzamida, 10 mM);hidroxilamina i hidrazina, 400 mM;enzim 0,9 μM.
Exemple 2(2):
Exemple 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Extremòfils, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Process Biochemistry, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Bioorganic Chemistry, 2017, disponible en línia 7.
